Effetto delle proteine morfogenetiche, desametasone e vitamina A+D sulla proliferazione e differenziazione cellulare degli osteoblasti umani adulti

Starting date
January 1, 1995
Duration (months)
12
Departments
Surgery, Dentistry, Paediatrics and Gynaecology
Managers or local contacts
Nocini Pier Francesco
Keyword
'morfogenetiche' 'desametasone' 'osteoblasti umani adulti'

4- Effetto delle proteine morfogenetiche, desametasone e vitamina A+D sulla proliferazione e differenziazione cellulare degli osteoblasti umani adulti.
I1 sistema cellulare più utilizzato come fonte per l’isolamento delle cellule ossee é quello derivante dall’impiego di calvaria di ratto embrionale o fetale. Mediante la digestione enzimatica con collagenasi della matrice non calcificata si ottengono le cellule osteoblasto-simili (OLC) capaci di proliferare e di mostrare una positività per la fosfatasi alcalina (ALP). In alternativa all’isolamento con tecnica enzimatica é possibile ottenere una coltura di OLC mediante una procedura di migrazione cellulare che sfrutta la proprietà degli osteoblasti di migrare dalla superficie endocranica dell’osso parietale e frontale su frammenti di vetro: Le cellule ottenute con questo metodo producono significative quantità di collagene di tipo 1, osteocalcina, sono in grado di mineralizzare previa aggiunta di beta-glicerofosfato e vitamina C al medium di coltura e presentano recettori di membrana per l’ormone parotideo e la vitamina D.
Le OLC ottenute con entrambe i metodi iniziano a proliferare e, una volta giunte a confluenza nelle flasks, si differenziano e sviluppano un fenotipo osteoblastico. In questa fase le cellule possono essere studiate con tecniche istologiche, immunoistochimiche e biochimiche. Le cellule possono presentare due tipi di crescita: in monostrato, a minor densità con morfologia cellulare poligonale o in multistrato, ad alta densità, con aspetto fusato; la. seconda tipologia è quella che esprime un fenotipo osteoblastico più marcato.
Questo modello sperimentale é già stato utilizzato nel corso del 1994 per valutare il grado di efficacia e le proprietà di interazione di vari fattori di crescita, vitamine ed ormoni sulla crescita cellulare e differenziazione degli osteoblasti umani del distretto mascellare.

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